Limite de cuantificación y detección.

Este bajo nivel se conoce como el resultado de alrededor de 40 verdaderos negativos. La interferencia en la microflora de la matriz que es relativamente resistente a los agentes selectivos usados en el medio de enriquecimiento, así como a otros factores, pueden afectar los valores observados.

Precisión

Es definido en términos de repetibilidad, reproducibilidad, y las consideraciones asociadas a positivo o negativo. Las diferentes matrices y los diferentes analitos son considerados como fuentes primordiales de variación.

Repetibilidad Intralaboratorio.

Cada nivel en el cual se agregan cepas (al menos 3, pero preferiblemente 5) debe ensayarse al menos en pentuplicado y preferiblemente con 10 replicas por nivel. Si en un estudio preliminar del Protocolo de validación (PVM) se obtiene un status OMA (Método oficial), el número de replicas por nivel debe incrementarse a 20 con tres niveles de inclusión de cepas (bajo, alto y sin pinchar).

Reproducibilidad Interlaboratorios.

Debe validarse en un mínimo de dos laboratorios, preferiblemente con diferentes lotes de cada matriz. Cada nivel en el que se agregan cepas (al menos 3, pero preferiblemente 5) debe ensayarse al menos en pentuplicado y preferiblemente con 10 replicas por nivel.

La variabilidad de la matriz del lote es importante debido al potencial competitivo de la microflora de lote a lote.

Falsos negativos y falso positivos

Siguiendo el método oficial de procedimiento de estudio precolaborativo, la siguiente tabla está basada en la asignación de la respuesta del método a la presencia o ausencia del analito determinada por inoculación o la metodología de referencia.

Sensitividad

Para las condiciones de ensayo especificadas, la sensitividad representa la proporción de las muestras de ensayo que contiene el analito y responde positivamente al ensayo.

Especificidad.

Para condiciones de ensayo determinadas, la especificidad es la proporción de las muestras de ensayo que no contienen el analito, y responden negativamente al ensayo.

Ensayo de Rudeza

Se deja a discreción el estudio del efecto de pequeños cambios en el medioambiente sobre un método de ensayo microbiológico (Ej. Temperatura de incubación).

Comparación con métodos de referencia existentes.

Opcionalmente, los resultados del método de estudio pueden compararse con los resultados obtenidos por un método de cultivo convencional usando muestras analíticas de la misma porción. Alternativamente, es preferible incrementar el alcance de las matrices y/o lotes de cada tipo de matriz que va a ser examinado por el método de ensayo. Cuando se tiene una matriz particularmente difícil, vale la pena utilizar el método de comparación.